|
На данной странице представлена ознакомительная часть выбранного Вами патента
Для получения более подробной информации о патенте (полное описание, формула изобретения и т.д.) Вам необходимо сделать заказ. Нажмите на «Корзину»
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЪЮГИРОВАННОЙ ФРАКЦИИ КОРТИЗОЛА В МОЧЕ |  |
Номер публикации патента: 2121686 |  |
| Редакция МПК: | 6 | | Основные коды МПК: | G01N033/536 | | Аналоги изобретения: | 1. Silber R.H., Porter C.C., Determination of 17, 21 - dinidroxy - 20-ketosteroids in urine and plasma, J.Biol.Chem., 1954, v.210, N 2, p.923 - 932. 2. Лабораторные методы исследования в клинике, Справочник под ред.В.В.Меньшикова, Москва, Медицина, 1987, с.253 - 255. 3. RU 2064179 C1 20.07.96. |
| Имя заявителя: | Московский областной научно-исследовательский клинический институт им.М.Ф.Владимирского | | Изобретатели: | Тишенина Р.С.
Валиулина Д.С.
Дугинова Ю.А.
Анашкина Г.А. | | Патентообладатели: | Московский областной научно-исследовательский клинический институт им.М.Ф.Владимирского |
Реферат | |
Из суточного количества нативной мочи отбирают 0,5-1 мл. Кипятят пробу в течение 1 мин. Охлаждают и добавляют к пробе равное количество раствора β-глюкуронидазы в ацетатном буфере с рН 4,5 из расчета 500 МЕ активности фермента на мл мочи. Проводят гидролиз полученной смеси при температуре 37oC в течение 18-20 ч. Отливают супернатант гидролизата и смешивают его и параллельно пробы нативной мочи с эфиром в соотношении 1:10-1:30. Экстрагируют смесь в течение 30-120 с. Затем после удаления водной фракции и эфира сухой остаток разбавляют фосфатным буфером с рН 7,2-7,4 с доведением объема до первоначального. Нагревают в течение 5 мин при температуре не выше 60oC. Охлаждают и добавляют раствор меченого I 125 кортизола и раствор специфических к кортизолу антител. После чего полученную пробу инкубируют при темперутаре 18-25oC в течение 1-4 ч. Добавляют преципитирующий реагент, содержащий вторые антитела к кортизолу. Центрифугируют в течение 10-30 мин при ускорении 1500-2000 g и температуре 18-25oC с последующим удалением супернатанта. В полученном осадке измеряют уровень γ-излучения. Подсчитывают радиоактивность по калибровочному графику. С учетом разведения и суточного диуреза в пробе гидролизованной мочи вычисляют показатель суточной экскреции суммарного кортизола. В пробе нативной мочи вычисляют показатель суточной экскреции свободного кортизола. Показатель содержания конъюгированной фракции кортизола получают вычитанием из показателя суточной экскреции суммарного кортизола показателя суточной экскреции свободного кортизола. Предлагаемый способ позволяет определить свободную, конъюгированную и суммарную экскрецию кортизола, может быть использован для дифференциальной диагностики заболеваний надпочечников, при назначении глюкокортикоидов с лечебной целью. Способ прост, специфичен. 1 ил., 1 табл.
|
Поиск патентов
Получить полное описание патента