KUROKAWA М. ЕТ AL: "Paired cloning of the T-cell receptor and genes from a single Т cell without the establishment of a T cell clone", Clin. Exp Immunol., 2001, v.123, p.340-345. WO 9916904, 08.04.1999. BURGART L.J. ЕТ AL: "Multiplex polymerase chain reaction", Mod Pathol., 1992, v.5, n.3, abstract;. CORONELLA J.A. ЕТ AL.:"Amplification of IdG VH and VL (Fab) from single human plasma cell and В cells", NAR, 2000, v.28, n.20, p.e85-1-e85-7. HARRIS E. ЕТ AL.: "Typing of dengue viruses in clinical specimens and mosquitoes by single-tube multiplex transcription PCR 1998", Journal of clinical microbiology, 1998, v.36, n.9, abstract. WO 9303151, 18.02.1993. CHAUDNARY V.K. ЕТ AL.: "A rapid method of cloning functional variable-region antibody genes in Escherichia coli as single-chain immunotoxins", PNAS, 1990, v.87, p.1066-1070. MULLINAX R.I. ЕТ AL.: "Expression of a heterodimeric Fab antibody protein in one cloning step", BioTechniques, 1992, v.l2, n.6, p.864-869. LITTLE M. ET AL.: "Human antibody libraries in Escherichia coli, 1995, Journal of biotechnology, 1995, v.41, n.2-3, abstract. WO 9215678, 17.09.1992. RU 2065765, 30.09.1994. RU 2128508, 06.11.1996. RU 2078572, 05.10.1997.
Имя заявителя:
СИМФОГЕН А/С (DK)
Изобретатели:
ОЛЕКСИЕВИЧ Мартин Б. (DK) НИЛЬСЕН Ларс С. (DK) АНДЕРСЕН Петер С. (DK) ХАНСЕН Маргит Х. (DK)
Патентообладатели:
СИМФОГЕН А/С (DK)
Приоритетные данные:
18.09.2003 US 60/504,589 18.09.2003 US 60/504,455 17.12.2003 DK PA200301867 15.05.2004 DK PA200400782
Реферат
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к множественной RT-PCR с удлинением цепи путем перекрывания. Предложенный способ эффективен для связывания двух или нескольких нуклеотидных последовательностей, кодирующих домены или субъединицы гетеромерного белка в результате выполнения одной реакции. Способ по настоящему изобретению, в частности, облегчает связывание последовательностей, кодирующих вариабельные области иммуноглобулинов, Т-клеточных рецепторов или В-клеточных рецепторов. Способ по настоящему изобретению также является более эффективным средством создания библиотек последовательностей, кодирующих вариабельные области. Возможность выполнения множественной RT-PCR с удлинением цепи путем перекрывания с использованием матрицы, полученной из выделенной отдельной клетки, обеспечивает высокоэффективное создание библиотек родственных пар. 4 н. и 47 з.п. ф-лы, 25 ил., 27 табл.