US 6,001,568, 14.12.1999. WO 2003000839, 03.01.2003. US 6,174,670, 16.01.2001. US 6,485,944, 12.03.1999. US 5,958,698, 28.09.1999. SAMATOV T.S. ET AL. "Expressible molecular colonies", NAR, 2005, v.33, n.17, e 145. MITRA R.D. ET AL. "Fluorescent in situ sequencing on polymerase colonies", analytical biochemistry, 2003, v.320, p.55-65. CHETVERINAH.V. ET AL. "Nanocolonies: detection, cloning and analysis of individual molecules", Biochemistry (Moscow), 2008, v/73, n.13, p.1361-1387.
Имя заявителя:
Четверин Александр Борисович (RU), Саматов Тимур Рустэмович (RU), Четверина Елена Владимировна (RU)
Изобретатели:
Четверин Александр Борисович (RU) Саматов Тимур Рустэмович (RU) Четверина Елена Владимировна (RU)
Патентообладатели:
Четверин Александр Борисович (RU) Саматов Тимур Рустэмович (RU) Четверина Елена Владимировна (RU)
Реферат
Изобретение относится к способам праймер-зависимого размножения нуклеиновых кислот в иммобилизованных средах, в частности, к способам обнаружения продуктов такого размножения. В изобретении предложен усовершенствованный способ идентификации, обнаружения изменений в нуклеотидной последовательности и определения числа молекул нуклеиновых кислот как отдельных молекул, так и содержащихся в клетках или во фрагментах ткани. Изобретение позволяет обнаруживать молекулярные колонии нуклеиновых кислот с помощью флуоресценции по мере роста колоний в иммобилизованной среде (в реальном времени) без осуществления дополнительной стадии гибридизации и без разгерметизации камеры, в которую заключена среда. Если колония образована более чем одной молекулой мишени, изобретение позволяет определить количество молекул мишени, давших начало данной колонии. Это, в свою очередь, позволяет определить пространственную локализацию и локальную концентрацию молекул РНК или ДНК данного вида в клетках или во фрагментах ткани, заключенных в гель на стадии полимеризации. Изобретение может найти широкое применение в качестве метода диагностики и инструмента научных исследований. 4 н. и 51 з.п. ф-лы, 11 ил.