Федеральное государственное учреждение здравоохранения "Ростовский-на-Дону ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (RU)
Изобретатели:
Подладчикова Ольга Николаевна (RU) Рыкова Виолетта Андреевна (RU)
Патентообладатели:
Федеральное государственное учреждение здравоохранения "Ростовский-на-Дону ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (RU)
Реферат
Выделен белок, обусловливающий свойство аутоагглютинации клеток Yersinia pestis, который расположен на поверхности клетки Yersinia pestis, и его наличие коррелирует со способностью бактерий к аутоагглютинативному росту в жидких питательных средах и с повышением гидрофобности клеток. Молекулярная масса белка 17,485 кДа, содержание белка 80%, углеводов нейтральных 6%. Способ получения белка включает выращивание штамма Y.pestis KM 1279 на 1,5% агаре LB, выросшую культуру смывают холодным забуференным физраствором и высушивают ацетоном. Клетки отмывают и осаждают центрифугированием на холоду, клеточный осадок суспендируют в растворе NaOH (pH 9,0), выдерживают при встряхивании при 26°С два часа и отделяют клетки центрифугированием (8000 об/мин). Супернатант фильтруют через мембрану, к фильтрату добавляют нейтрализованный раствор сульфата аммония до 25% насыщения, выдерживают до формирования осадка, который отделяют центрифугированием и освобождают от сульфата аммония диализом. К диализованному раствору добавляют НСl до рН 4,6, инкубируют до формирования осадка, центрифугируют, осадок растворяют в 5 мМ NaOH. Белок осаждают ацетоном, выдерживают на холоду, центрифугируют и осадок лиофильно высушивают. Белок используют для изучения его протективных свойств, возможности создания на его основе препаратов для вакцинирования и оценки его участия в реализации вирулентных свойств возбудителя чумы. 2 н.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл., 4 пр.