WO 94/18339 A1, 18.08.1994. WO 99/22019 A1, 06.05.1999. US 5627044 A, 06.05.1997. SU 989867 A1, 15.10.1985. HANSEN ANDREW P. et al. A practical method for uniform isotopic labeling of recombinant protein in mammalian cells. Biochemistry, 1992. v. 31, no. 51, p.12713-12718.
Имя заявителя:
ЕГОРОВА-ЗАЧЕРНЮК Татьяна А. (NL)
Изобретатели:
ЕГОРОВА-ЗАЧЕРНЮК Татьяна А. (NL)
Патентообладатели:
ЕГОРОВА-ЗАЧЕРНЮК Татьяна А. (NL)
Приоритетные данные:
11.07.2003 NL PCT/NL03/00514
Реферат
Для приготовления питательной среды используют микроорганизмы, которые выращивают на минеральной среде, поддерживающей рост этого организма, причем по существу все из ассимилируемых атомов являются изотопно-меченными, для получения меченой биомассы. Полученную биомассу подвергают автолизу для получения меченого автолизата. Эта биомасса может быть дополнительно экстрагирована органическим растворителем для получения липидов. Делипидированную биомассу гидролизуют для получения меченых аминокислот и других питательных веществ, которые используют вместе с автолизатом, экстрагированными липидами и дополнительными компонентами для приготовления питательной среды для выращивания клеток млекопитающих или насекомых в культуре для синтеза биомолекул. Полученная биомолекула является мембранным белком млекопитающего, в частности, в котором 20-100% атомов водорода в этом белке являются тотально замещенными изотопом 2Н. Однородное мечение стабильными изотопами позволяет определить трехмерную структуру биомолекулы, такой как мембранный белок млекопитающего, например, ЯМР-спектроскопией. 6 н. и 24 з.п. ф-лы, 4 ил.