ПЛАЗМИДНЫЙ ВЕКТОР pE - Lc - LTP, ШТАММ БАКТЕРИИ Escherichia coli ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ ЛИПИД - ТРАНСПОРТИРУЮЩИХ БЕЛКОВ ЧЕЧЕВИЦЫ Lens culinaris И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ УКАЗАННЫХ БЕЛКОВ
RU 2316590 C1, 10.02.2008. US 6,337,093, 08.01.2002.
Имя заявителя:
Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU)
Изобретатели:
Овчинникова Татьяна Владимировна (RU) Финкина Екатерина Ивановна (RU) Баландин Сергей Владимирович (RU)
Патентообладатели:
Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU)
Реферат
Изобретение относится к области биотехнологии. Описан плазмидный вектор pE-Lc-LTP для экспрессии в клетках Escherichia coli белков Lc-LTP, содержащий ген гибридного полипептида Trx-Lc-LTP, включающего аминокислотную последовательность Lc-LTP, последовательность белка тиоредоксина и аффинную метку. Представлен штамм-продуцент данного гибридного полипептида на основе штамма бактерий E.coli. Предложен способ получения целевого белка Lc-LTP путем экспрессии содержащего его гибридного полипептида Trx-Lc-LTP в клетках указанного штамма, разрушения клеток, аффинной очистки гибридного полипептида Trx-Lc-LTP на металлохелатном носителе, расщепления гибридного белка по сайту, расположенному между последовательностями Lc-LTP и тиоредоксина, и очистки целевого белка Lc-LTP с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ. Изобретение может найти применение в области сельского хозяйства в качестве факторов, повышающих устойчивость растений к инфекциям, и в медицинской практике для диагностики и лечения пищевой аллергии. Изобретение решает задачу повышения эффективности и упрощения технологии получения липид-транспортирующих белков чечевицы Lens culinaris (Lc-LTP). 3 н. и 6 з.п. ф-лы, 4 ил.