|
На данной странице представлена ознакомительная часть выбранного Вами патента
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО ИНТЕРЛЕЙКИНА - 3 И РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК P3PTEIL3 И ШTAMM ESCHERICHIA COLI BL 21 (DE3)/P3PTEIL3 ДЛЯ ЕГО ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ |  |
Номер публикации патента: 95109756 |  |
| Вид документа: | A1 | | Страна публикации: | RU | | Рег. номер заявки: | 95109756 |
|
|
|
| Имя заявителя: | Институт биоорганической химии им.М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН | | Изобретатели: | Гуревич А.И.
Качалина Т.А.
Мирошников А.И.
Свердлов Е.Д.
Ажикина Т.Л.
Ростапшов В.М.
Есипов Р.С.
Вульфсон А.Н.
Тихонов Р.В.
Костро |
Реферат | |
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генной и белковой инженерии, и позволяет получать человвеческий интерлейкин-3 микробиологическим синтезом при упрощенной технологии его получения. Способ получения человеческого интерлейкина-3 основан на использовании новой рекомбинантной плазмидной ДНК р3PTEIL3, в которой искусственный ген человеческого интерлейкина-3 находится под контролем тандема трех промоторов (Р8, Рtac и Рt7) и его экспрессия происходит после индукции изопропилтиогалктозидом, и штамма-продуцента Е. coli ВL21(DE3), обеспечивающего высокий уровень биосинтеза целевого белка (до 30% тотального клеточного белка). Рекомбинантная плазмида содержит тандем промоторов Р8, Рtac и Рt7, два lас-оператора, усилитель трансляции гена 10 фага Т7, терминатор транскрипции фага fd, ген β- лактамазы и искусственный ген человеческого интерлейкина-3. Штамм Escherichia coli ВL21(DЕ3)/рЗРТЕIL3 получают путем трансформации компетентных клеток Е. coli ВL21(DE3) плазмидой р3PTEIL3. Штамм Escherichia coli ВL21(DЕ3)/рЗРТЕIL3 культивируют в богатой среде, выращенные клетки разрушают в буферном растворе и выделяют рекомбинантный человеческий интерлейкин-3 из телец включения, и затем ренатурируют его известным способом.
|
Поиск патентов