KR 20000065580, 15.11.2000. MOGUILEVSKY N. ет al. Production of authentic human proapolipoprotein A-1 in Escherichia coli: strategies for the removal of the aminoterminal methionine// J. biotechnol. - 1993, v.27, n.2, p.159-172. RU 3219502, 20.03.2008. Последовательность 1RH2_A, 19.11.1996, найдена в Интернете <URL:http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?PRROGRAM=blastp&BLAST_PROGRAMS=lastp&P AGE_TYPE=BlastSearch&SHOW_DEFAULTS=on&LINK_LOC=blasthome, 25.11.2010. LICHAREVA V.V. et al. New substrates for enteropeptidase: I. Biologically active hepta-, octa-, and nonapeptides// Russian journal of biological chemistry. V.29, n.2, p.112-116. PLATIS D. & FOSTER GRAHAM. High yield expression, refolding and characterization of recombinant interferon 2/8 hybrids in Escherichia coli". Protein expression and purification// 2003, v.31, p.222-230. GOLDERER G. et al. GTP cyclohydrolase I mRNA: novel splice variants in the slime mould Physarum polycephalum and in human monocytes (THP-1) indicate conservation of mRNA processing// Biochem J. - 2001, v.355, p.499-507. WO 86/01229, 27.02.1986.
Имя заявителя:
Российская Федерация, от имени которой выступает Министерство образования и науки Российской Федерации (RU), Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП ГосНИИгенетика) (RU)
Изобретатели:
Широков Дмитрий Алексеевич (RU) Рябиченко Виктор Васильевич (RU) Акишина Раиса Илларионовна (RU) Глазунов Александр Викторович (RU) Честухина Галина Георгиевна (RU) Вейко Владимир Петрович (RU)
Патентообладатели:
Российская Федерация, от имени которой выступает Министерство образования и науки Российской Федерации (RU) Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП ГосНИИгенетика) (RU)
Реферат
Изобретение относится к микробиологической промышленности, медицинской биотехнологии и генной инженерии. Предложен новый способ получения безметионинового интерферона-альфа2b человека. Вначале конструируют рекомбинантные плазмидные ДНК, содержащие ген интерферона-альфа2b человека, перед которым расположен сайт протеолиза энтеропептидазой, и трансформируют ими клетки Escherichia coli. Культивируют клетки и выделяют тельца включения синтезированного предшественника. Затем осуществляют частичную ренатурацию выделенного предшественника в присутствии препятствующего замыканию дисульфидных связей дитиоэритриола. Проводят гидролиз предшественника ферментом энтеропептидазой с образованием безметионинового интерферона-альфа2b человека. После завершения реакции гидролиза предшественника проводят полную ренатурацию интерферона-альфа2b человека в присутствии способствующей замыканию дисульфидных связей пары соединений цистин и цистеин. Очистка полученного белка осуществляется методом хроматографии на КМ-сефарозе. 5 ил.
Поиск патентов
Получить полное описание патента