US 5646016, 07.08.1997. US 2007190024 A1, 16.08.2007. US 6143524, 07.11.2000. EA 0011261 B1, 27.02.2009.
Имя заявителя:
Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU), Учреждение Российской академии медицинских наук Гематологический научный центр РАМН (RU)
Изобретатели:
Мирошников Анатолий Иванович (RU) Воробьев Иван Иванович (RU) Пономаренко Наталья Александровна (RU) Смирнов Иван Витальевич (RU)
Патентообладатели:
Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU) Учреждение Российской академии медицинских наук Гематологический научный центр РАМН (RU)
Реферат
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения рекомбинантного интерлейкина-11 (рИЛ-11) человека. Рекомбинантную плазмидную ДНК pET32M/mTrx-rhIL-11 получают способом, который включает синтез четырех фрагментов гена рекомбинантного интерлейкина-11 человека из олигонуклеотидных праймеров, клонирование каждого фрагмента в рестрицированный эндонуклеазой EcoRV плазмидный вектор pGEM5z, трансформацию каждой из 4-х плазмид клеток E.coli штамма DH5a, отбор кодирующих соответствующие фрагменты гена интерлейкина-11 человека клонов, отбор плазмид с фрагментами гена интерлейкина-11 человека без мутаций, объединение всех фрагментов гена рекомбинантного интерлейкина-11 человека в плазмидном векторе pUC19, конструирование вектора рЕТ32М на основе плазмиды pET32b, переклонирование гена рекомбинантного интерлейкина-11 человека в экспрессионный вектор рЕТ32М, кодирующий тиоредоксин 1 E.coli с заменой Asn84/Gln. Полученной ДНК трансформируют клетки штамма E.coli BL21(DE3) с получением штамма E.coli BL21(DE3)/pET32M/mTrx-rhIL-11 - продуцента рекомбинантного интерлейкина-11 человека в составе растворимого слитного белка mTrx-rhIL-11. Изобретение обеспечивает эффективную продукцию рИЛ-11 в клетках E.coli. 3 н.п. ф-лы, 5 ил., 1 табл.