RU 2285921 C1, 20.10.2006. BOYTON R.J. et al. HLA-C and Killer Cell Immunoglobulin-like Receptor Genes in Idiopathic Bronchiectasis, 2006, American journal of respiratory and critical care medicine, v.173, p.327-333. ИВАНОВ П.Л. и др. Подготовка биологического материала для молекулярно-генетических идентификационных исследований при массовомпоступлении неопознанных тел, найдено в Интернет <URL:www.MEDLITER.ru, 17.08.2010. Болдырева М.Н. «HLA (класс II) и естественный отбор. Функциональный генотип, гипотеза преимущества «функциональной гетерозиготности»: автореферат - М., 2007, стр.8.
Имя заявителя:
Смолянинов Александр Борисович (RU), ООО "Покровский банк стволовых клеток" (RU)
Изобретатели:
Смолянинов Александр Борисович (RU) Котелевская Елена Александровна (RU) Смирнова Светлана Алесандровна (RU) Иволгин Дмитрий Александрович (RU) Масленникова Ирина Ивановна (RU)
Патентообладатели:
Смолянинов Александр Борисович (RU) ООО "Покровский банк стволовых клеток" (RU)
Реферат
Способ HLA-типирования цельной крови относится к области биотехнологии. Способ включает выделение ДНК из крови, используя набор реагентов различных растворов буферов ELB A, ELB В и центрифугирование с различным ускорением, проводят отмыв образца крови 0,7 мл, удаляя эритроциты и их остатки, оставляя лейкоциты, проводят лизирование лейкоцитов с помощью раствора TBS, осаждение ДНК на мембране из этого же набора и механическое воздействие центрифугированием, добиваясь получения ДНК высокой степени чистоты. Проверку концентрации ДНК проводят на спектрофотометре DU 800 с использованием бидистиллированной воды, сравнивая чистоту последней с качеством чистоты отмытой ДНК. Генотипирование крови осуществляют посредством молекулярно-генетического метода полимеразной цепной реакции (ПЦР), размещая на рабочей станции PROTRANS планшет с лиофилизированными праймерами из набора Protrans HLA-A*, В*, DRBI*, используя смесь буферов D, Y и Taq полимеразы и образцы ДНК, осуществляя амплификацию в термоциклере по установленной программе действий с выбранными параметрами. Визуализацию результатов ПЦР осуществляют методом электрофореза агарозным гелем, подкрашенным бромистым этидием, размещенным в электрофоретической ячейке. Под действием тока молекулы ДНК проходят через гель. По наличию продукта в лунке планшета со специфическими праймерами определяется HLA-генотип. Изобретение повышает надежность и качество результатов определения типирования. 1 табл.
Поиск патентов
Получить полное описание патента