На данной странице представлена ознакомительная часть выбранного Вами патента
Для получения более подробной информации о патенте (полное описание, формула изобретения и т.д.) Вам необходимо сделать заказ. Нажмите на «Корзину»
РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pSS5, КОДИРУЮЩАЯ СИНТЕЗ РЕКОМБИНАНТНОГО ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО АЛЬФА - 2b ИНТЕРФЕРОНА, ШТАММ ESCHERICHIA COLI SS5 - ПРОДУЦЕНТ РЕКОМБИНАНТНОГО ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО АЛЬФА - 2b ИНТЕРФЕРОНА И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНТЕРФЕРОНА АЛЬФА - 2b | |
Номер публикации патента: 2165455 | |
Имя заявителя: | Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов (RU) | Изобретатели: | Черепанов П.А. (RU) Михайлова Т.Г. (RU) Черепанов П.П. (RU) Мартиненко Дмитрий Леонидович (UA) Шевчук Александр Анатольевич (UA) Федюкин В.С. (RU) Николаев Т.М. (RU) Толкачев Б.Б. (RU) Свентицкий Е.Н. (RU) Ураков Н.Н. (RU) Калинин Ю.Т. (RU) Денисов Л.А. (RU) Тяготин Ю.В. (RU) Мартюшин С.В. (RU) Ищенко А.М. (RU) Трофимов А.В. (RU) Полякова Е.А. (RU) Батарин В.И. (RU) Шалаева О.Н. (RU) Лисицкая В.И. (RU) | Патентообладатели: | Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов (RU) Акционерное общество закрытого типа Научно-производственная компания "ДиапрофМЕД" (UA) Закрытое акционерное общество "СоюзАгромед" (RU) Государственный научный центр прикладной микробиологии (RU) |
Реферат | |
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения рекомбинантного лейкоцитарного интерферона альфа 2b человека медицинского назначения (ИНТ). Рекомбинантной мультикопийной плазмидной ДНК pSS5, кодирующей синтез лейкоцитарного альфа -2b интерферона человека, экспрессия которого находится под контролем лактозного, фага Т7 и триптофанового промоторов и терминатора транскрипции rrn BT1T2, содержащей ген устойчивости к канамицину и содержащей фрагмент ДНК из плазмиды pUC19, ответственный за репликацию рекомбинантной плазмиды, трансформируют клетки реципиентного штамма Е. coli BL 21(DE3). Получают штамм Е. coli SS5 с продуктивностью не менее 800 мг альфа -2b интерферона с суммарной активностью 1-2х1011 ME на 1 л культуральной среды или 15-20 г влажной биомассы клеток штамма. Способ предусматривает культивирование на питательной среде, замораживание культуральной жидкости при температуре не выше -70°С, ее размораживание при повышении температуры до 4°С, введение в культуральную жидкость лизоцима, удаление ДНК и РНК обработкой лизата ДНК-азой, концентрирование полученного продукта отмывкой белка растворами неионных детергентов, центрифугированием и растворением образовавшегося осадка в растворе гуанидин гидрохлорида с последующей ренатурацией интерферона и его очисткой с использованием ионообменной хроматографии на ионообменных смолах типа Ватман СМ 52 целлюлоза. Изобретение позволяет повысить продуктивность получения ИНТ. 3 с. и 4 з.п.ф-лы, 1 ил.
|