WO 2006008296 A1, 26.01.2006. Демаков В.А. и др. Иммобилизация клеток микроорганизмов: биотехнологические аспекты. // Биотехнология, 2008, 2, с.30-45. Бидей С.П. и др. Иммобилизованные клетки и ферменты. Методы: Пер. с англ. / Под ред. Дж.Вудворда. - М.: Мир, 1988, с.55-62. TERRENI М. ЕТ AL. Enzymatic synthesis of cephalosporins. Theimmobilized acylase from Arthrobacter viscosus: A new useful biocatalyst. // Appl. Microbiol. Biotechnol., 2007, 77:579-587. CRUZ A.J.G. ЕТ AL. Cephalosporin С Production by Immobilized Cephalosporium acremonium Cells in a Repeated Batch Tower Bioreactor. // Biotechnology and bioengineering, vol. 85. no. 1, 2004, 96-102. NYS P.S. ЕТ AL. General principles of immobilized cell biocatalyst design for antibiotic production // Indian Journal of Chemistry, vol. 32B, 1993, 11-15. SATO Т. ЕТ AL. Continuous Production of 6-Aminopenicillanic Acid from Penicillin by Immobilized Microbial Cells. // European J. Appl. Microbiol., 2, 1976, 153-160.
Имя заявителя:
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП ГосНИИгенетика) (RU), Сичуаньский индустриальный институт антибиотиков, Синофарм (СИИА) (CN)
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП ГосНИИгенетика) (RU) Сичуаньский индустриальный институт антибиотиков, Синофарм (СИИА) (CN)
Реферат
Изобретение относится к биотехнологии. Способ предусматривает культивирование клеток Escherichia coli, продуцирующих синтетазу цефалоспоринов-кислот. В качестве критериев выбора момента прекращения процесса биосинтеза фермента используют величину рН культуральной жидкости и константу распределения целевого фермента Красп=Абмк/Ар-р, где Абмк - ферментативная активность биомассы клеток (МЕ/г влажн.), а Ар-р - ферментативная активность надосадочной жидкости (МЕ/мл). Процесс биосинтеза синтетазы цефалоспоринов-кислот прекращают при Красп не менее 350 и значении рН 7,9÷8,2. Полученную биомассу клеток в концентрации 100÷150 мг сух./г полимеризационной смеси суспендируют в растворе акриламида и N,N'-метилен-бис-акриламида при весовом отношении 20:1. В течение 5÷30 мин осуществляют модификацию клеток глутаровым альдегидом, взятым в относительной концентрации 1·10-3÷9·10-3 ммоль/мг белка. Процесс полимеризации инициируют солью надсерной кислоты. Способ позволяет получить биокатализатор, обладающий высокими целевой активностью и стабильностью и не содержащий вымываемых при эксплуатации белков, загрязняющих целевой продукт биокаталитической трансформации. Синтетазная активность биокатализатора составляет 750-950 МЕ/г сух. 3 табл.