Закрытое Акционерное Общество Научно-производственное предприятие "Тринита" (RU)
Изобретатели:
Исаев Вячеслав Арташесович (RU) Руденская Галина Николаевна (RU) Руденская Юлия Андреевна (RU) Лютова Людмила Васильевна (RU) Балашова Мария Викторовна (RU)
Патентообладатели:
Закрытое Акционерное Общество Научно-производственное предприятие "Тринита" (RU)
Реферат
Изобретение может быть использовано в биотехнологии. Проводят гомогенизацию сырья в 0,1 М ацетате аммония, содержащем 0,1-1 мМ ацетата кальция при рН 6,4-7,0. Гомогенат центрифугируют, к супернатанту добавляют сульфат аммония до 60-70%-ного насыщения. Полученный комплекс ферментов отделяют центрифугированием, растворяют в дистиллированной воде с добавлением 0,1-1 мМ ацетата кальция до получения истинного раствора. Затем очищают, концентрируют и обессоливают ферменты на поливолоконной мембране с размером пор 100 кДа. Промывают супернатант, содержащий ингибитор коллагеназы, дистиллированной водой, прогревают до 60-100°С, отделяют осадок центрифугированием. Полученный суммарный препарат ингибитора коллагеназы подвергают дополнительному растворению в 0,1 М ацетата аммония с рН 6,0-6,4, отделяют осадок центрифугированием и добавляют к супернатанту сульфат аммония 35-45% насыщения. Осадок отделяют и растворяют в 0,01 М трисовом буфере с рН 7,0-8,0. Раствор прогревают при 70-90°С, подвергают центрифугированию. Полученную сульфат-пасту растворяют в 0,05 М Трис-буфере с рН 8,0 с добавлением 0,5 М NaCl. Фракционируют гель-фильтрацией на Сефадексе G-100 с последующим концентрированием активных фракций ультрафильтрацией на мембране с размером пор 30-50 кДа. Супернатант, содержащий целевой продукт, промывают и лиофильно высушивают. Изобретение позволяет расширить ассортимент препаратов, обладающих противосвертывающим действием. 2 з.п. ф-лы, 5 ил, 4 табл.
Поиск патентов
Получить полное описание патента