См. интернет http://inmi.ru/documents/MolConf_Materials.pdf, 2007, ноябрь. BOGHOS DEDEYAN et. al. Biochemical and Molecular Characterization of a Laccase from Marasmius guercophilus, Applied and Environmental microbiology, Mar., 2000, p.925-929. SU 1068477 A1, 23.01.1984. KRISTINA HILDEN et. al. Novel thermotolerant laccases produced by thewhite-rot fungus Pgysisporinus rivulosus, Appl. Microbiol. Biotechnol. 2007, p.301-309. BENNY CHEFETZ et. al. Purification and Characterization of Laccase from Chaetomium thermohilium and its role in huminication, Applied and Environmental microbiology, sept. 1998, p.1375-1379. RU 2345135 C2, 10.10.2006. GLAUDIA EGGERT et. al. The ligninolytic system of the white rot fungus Pycnoporus cinnabarinnus: Perification and characterization of the laccase, Applied and Environmental microbiology, apr., 1996, p.1151-1158. RU 2035512 C1, 20.05.1995.
Имя заявителя:
Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН (RU), Головлева Людмила Алексеевна (RU)
Изобретатели:
Черных Алексей Михайлович (RU) Коломыцева Марина Павловна (RU) Мясоедова Нина Михайловна (RU) Головлева Людмила Алексеевна (RU) Псурцева Надежда Васильевна (RU) Белова Нина Васильевна (RU)
Патентообладатели:
Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН (RU) Головлева Людмила Алексеевна (RU)
Реферат
Изобретение относится к биотехнологии и микробиологии, а именно к микробиологическому получению ферментных препаратов - лакказ, и может быть использовано при модификации лигниносодержащих материалов и получении из них промышленно ценных соединений, отбеливании бумажной массы и текстильных материалов, очистке сточных вод и почвы от целого ряда ксенобиотиков, полимеризации фенолов и ряда других ароматических соединений, получении косметических препаратов для отбеливания кожи и окрашивания волос. Способ предусматривает выращивание гриба Steccherinum ochraceum LE (BIN) 1833 D на глюкозопептонной среде. Полученную культуральную жидкость отделяют от мицелия фильтрацией и центрифугируют. Полученный супернатант наносят на колонку с DE52 целлюлозой, уравновешенную 20 мМ натрий-ацетатным буфером (буфер А). Элюируют линейный градиентом 0-0,5 М NaCl в буфере А. Полученные фракции с лакказной активностью объединяют. Концентрируют. Обессоливают и наносят на колонку с ионообменным носителем Q-Sepharose, предварительно уравновешенную буфером А. Элюируют линейным градиентом 0-0,5 М NaCl в буфере А. Полученные две фракции с лакказной активностью концентрируют и обессоливают. Полученную первую фракцию с лакказной активностью концентрируют и наносят на колонку Superdex 75. Элюируют 0,1 М NaCl в буфере А. Полученные фракции с лакказной активностью объединяют и концентрируют с получением лакказы I. Полученную после хроматографии на колонке с Q-Sepharose вторую фракцию с лакказной активностью концентрируют и наносят на колонку с ионообменным носителем Resource Q. Элюируют линейным градиентом 1М NaCl в буфере А. Полученные две фракции с лакказной активностью концентрируют и обессоливают. Полученную после хроматографии на колонке с Resource Q первую фракцию с лакказной активностью наносят на колонку с Superdex 75. Элюируют 0,1 М NaCl в буфере А. Полученные фракции с лакказной активностью объединяют и концентрируют с получением лакказы II. Полученную после хроматографии на колонке с Resource Q вторую фракцию с лакказной активностью наносят на колонку с Superdex 75 и элюируют 0,1 М NaCl в буфере А. Полученные фракции с лакказной активностью объединяют и концентрируют с получением лакказы III. Изобретение позволяет повысить стабильность лакказы. 2 н.п. ф-лы, 4 ил., 2 табл.
Поиск патентов
Получить полное описание патента