|
На данной странице представлена ознакомительная часть выбранного Вами патента
Для получения более подробной информации о патенте (полное описание, формула изобретения и т.д.) Вам необходимо сделать заказ. Нажмите на «Корзину»
| ХИМИЧЕСКИ МОДИФИЦИРОВАННЫЙ ТЕРМОСТАБИЛЬНЫЙ ФЕРМЕНТ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ, СПОСОБ АМПЛИФИКАЦИИ СОДЕРЖАЩЕЙСЯ В ОБРАЗЦЕ НУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ, РЕАКЦИОННАЯ СМЕСЬ ДЛЯ ЕГО ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ И НАБОР ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ |  |
Номер публикации патента: 2174556 |  |
| Редакция МПК: | 7 | | Основные коды МПК: | C12N009/04 C12N009/12 C12N009/99 C12Q001/68 | | Аналоги изобретения: | US 5262525, 16.11.1993. WO 92/03556 A1, 05.03.1992. Fransis Barany. Genetic disease detection and DNA amhlitication using cloned thermostable ligase. Proc. Natl. Acad. Sci, 1991, v.88, p.189-193. WO 95/25180, 21.09.1995. WO 95/21271, 10.08.1995. US 4683202, 28.07.1987. US 4695188, 23.10.1990. |
| Имя заявителя: | Ф. ХОФФМАНН-ЛЯ РОШ АГ (CH) | | Изобретатели: | БИРЧ Дэвид Эдвард (US)
ЛЭРД Уолтер Джозеф (US)
ЗОККОЛИ Майкл Энтони (US) | | Патентообладатели: | Ф. ХОФФМАНН-ЛЯ РОШ АГ (CH) | | Номер конвенционной заявки: | 60/002.673 | | Страна приоритета: | US | | Патентный поверенный: | Веселицкая Ирина Александровна |
Реферат | |
Изобретение относится к биотехнологии к области нуклеиновых кислот, касается амплификации последовательностей нуклеиновых кислот. Химически модифицированный фермент характеризуется тем, что термостабильная ДНК-полимераза или термостабильная лигаза обратимо инактивирована в водном буфере при щелочном значении рН, при температуре ниже приблизительно 25°С модифицирующим реагентом, что не приводит к существенному увеличению ферментативной активности в течение промежутка времени менее приблизительно 20 мин. Модифицирующим реагентом выбран ангидрид дикарбоновой кислоты. Инкубация химически модифицированного фермента в водном буфере, значение рН которого доведено до приблизительно 8-9 при 25°С, при температуре выше приблизительно 50°С приводит по крайней мере к двукратному увеличению ферментативной активности в течение промежутка времени менее приблизительно 20 мин. Химически модифицированную лигазу или ДНК полимеразу применяют для амплификации нуклеиновых кислот. Для чего активность инактивированного фермента восстанавливают путем инкубации реакционной смеси при повышенной температуре перед реакцией амплификации или этот процесс является составной частью реакции амплификации. Необратимо инактивированный термостабильный фермент, применяемый в ПЦР-амплификации, существенно снижает неспецифическую амплификацию и существенно увеличивает количество нужной амплифицированной последовательности-мишени. 5 с. и 10 з.п. ф-лы, 5 ил., 6 табл.
|
Поиск патентов
Получить полное описание патента