На данной странице представлена ознакомительная часть выбранного Вами патента
Для получения более подробной информации о патенте (полное описание, формула изобретения и т.д.) Вам необходимо сделать заказ. Нажмите на «Корзину»
НЕГЛИКОЗИЛИРОВАННЫЙ ПОЛИПЕПТИД СО СВОЙСТВАМИ ПРОУРОКИНАЗЫ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ, РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ ПОЛИПЕПТИДА И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ | |
Номер публикации патента: 2108387 | |
Имя заявителя: | Грюненталь ГмбХ (DE) | Изобретатели: | Герд Йозеф Штеффенс[DE] Вольфганг Амандус Гюнцлер[DE] Леопольд Флое[DE] Регина Эльфриде Бригелиус-Флое[DE] Бернхард Вольф[DE] | Патентообладатели: | Грюненталь ГмбХ (DE) | Номер конвенционной заявки: | P 4101736.6 | Страна приоритета: | DE |
Реферат | |
Изобретение относится к биотехнологии и позволяет получить полипептиды, используемые в качестве плазминогенных активаторов, имеющие высокую удельную амидолитическую и фибринолитическую активность. При получении полипептида со свойствами проурокиназы проводят трансформацию штамма E.coli рекомбинантной плазмидой, включающей фрагмент ДНК, кодирующий целевой продукт. Отбирают трансформанты. Культивируют их в оптимальных для накопления рекомбинантного полипептида условиях. Отделяют и проводят реактивацию экспрессированного продукта. При получении плазмиды для экспрессии полипептида в клетках энтеробактерий объединяют оперон с регулируемым промотором последовательности связывания с рибосомой Шайн-Дальгарно, инициирующий кодон, фрагмент ДНК, кодирующий целевой полипептид, один или два терминатора, располагаемых за указанным фрагментом. Для объединения используют плазмиду pBR 322, из которой удалены nic / bom область и/или часть резистентного к тетрациклину гена. В последнюю между сайтами E coRI и Hind III вводят сайт множественного клонирования, предназначенный для встраивания терминатора транскрипции, фрагмента ДНК, кодирующего целевой полипептид и синтетического Tr p - промотора. Получают полипептиды общей формулы Met - Ser - x1 - x2 - rscu РА 143-411. rscu РА 143-411 представляет область последовательности аминокислот 143 (Glu-411 (LeuOH) из scu PA 54к. x1 означает одну из аминокислот Asn, Pro или Ser, а x2 представляет собой простую связь или Glu, или Pro - Glu, или Pro - Pro - Glu, или Glu - Leu - His - Leu - Leu - Gln - Val - Pro - Ser. 4 с. и 7 з.п. ф-лы, 20 ил.
|