|
На данной странице представлена ознакомительная часть выбранного Вами патента
Для получения более подробной информации о патенте (полное описание, формула изобретения и т.д.) Вам необходимо сделать заказ. Нажмите на «Корзину»
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МЕТИЛАЗЫ E. CO R11 |  |
Номер публикации патента: 1311253 |  |
| Редакция МПК: | 6 | | Основные коды МПК: | C12N009/16 | | Дополн. коды МПК: | C12N009/16 C12R001/19 | | Аналоги изобретения: | Бурьянов А.И., Богдарина И.Т., Баев А.А. Выделение ДНК - цитозинметилтрансфераз из E.coli B (R 11), E.coli K 12 (R 11). ДАН СССР, 1977, т. 237, 2, с.465-468. |
| Имя заявителя: | Научно-производственное объединение "Биохимреактив" | | Изобретатели: | Косых В.Г.
Миериня А.А.
Зеидака А.А.
Бурьянов Я.И.
Баев А.А.
Шпрунка |
Реферат | |
Изобретение относится к молекулярной биологии и генетике, конкретно - к способам получения ферментов модификации ДНК-метилазы E. co R11. Цель изобретения - повышение выхода и удельной активности фермента. Для получения метилазы E. co R11 культивируют штамм-продуцент Escherichia coli B 834  / pSK 323. Клетки дезинтегрируют в присутствии лизоцима и разрушают ультразвуком. После центрифугирования фермент в супернатанте осаждают полиэтиленимином, который добавляют до конечной концентрации 0,3 - 0,4%, затем метилазу извлекают из осадка 0,4 - 0,5 М раствором хлористого калия в ФЕМ-буфере, высаживают сульфатом аммония, диализуют и подвергают очистке на ДЕАЕ-целлюлозе при элюировании хлористым калием в линейном градиенте концентрации от 0 до 0,2 М. Дальнейшую очистку проводят на фосфоцеллюлозе при элюировании тем же раствором в линейном градиенте концентрации 0,3 - 0,6 М. Фракции, содержащие метилазу, объединяют и диализируют против 50%-ного раствора глицерина. Выход метилазы 1,2·104 ед./г биомассы, удельная активность 5,7·105 ед./мг белка. 2 ил.
|
Поиск патентов
Получить полное описание патента