CAMPOS S.K. ЕТ AL., Comparison of adenovirus fiber, protein IX, and hexon capsomeres as scaffolds for vector purification and cell targeting, Virology, 2006, v.349, no.2, pp.453-462. CAMPOS S.K. ET AL., Avidin-based targeting and purification of a protein IX-modified, metabolically biotinylated adenoviral vector, Mol Ther, 2004, v.9, no.6,pp.942-954. RU 2009137571 A, 20.04.2011. SU 1364342 A1, 07.01.1988. US2002037565 A1, 28.03.2002.
Имя заявителя:
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (RU)
Изобретатели:
Рогожин Василий Николаевич (RU) Логунов Денис Юрьевич (RU) Шмаров Максим Михайлович (RU) Тухватулин Амир Ильдарович (RU) Лунин Владимир Глебович (RU) Народицкий Борис Савельевич (RU) Гинцбург Александр Леонидович (RU)
Патентообладатели:
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (RU)
Реферат
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу очистки рекомбинантных аденовирусов млекопитающих и человека. Способ включает накопление аденовируса в пермиссивной культуре клеток линии НЕК-293, сбор этих клеток, высвобождениие рекомбинантных аденовирусов за счет разрушения клеток путем перемораживания и их очистку. Используют рекомбинантный капсид-модифицированный аденовирус с модифицированным капсидным белком рlХ, несущим полисахарид-связывающий домен, который выбирают из группы, включающей целлюлозо-связывающий домен, декстран-связывающий домен. Производят посадку рекомбинантных капсид-модифицированных аденовирусов на полисахаридный носитель, который выбирают из группы, включающей целлюлозный носитель для связывания с целлюлозо-связывающим доменом, декстрановый носитель - для связывания с декстран-связывающим доменом. Инкубируют полученную смесь. Осуществляют процесс очистки, для чего полисахаридный носитель с аденовирусами осаждают центрифугированием, а полученный супернатант удаляют. Промывают осажденный полисахаридный носитель с аденовирусами промывочными буферами, после этого производят элюирование аденовирусов с полисахаридного носителя. Производят разделение полученной суспензии центрифугированием. Отбирают вируссодержащий супернатант и стабилизируют его. Предложенное изобретение позволяет получить биологически активный, хроматографически чистый и концентрированный аденовирусный препарат и сократить время его очистки. 14 з.п. ф-лы, 4 ил., 2 табл., 4 пр.