WO 2008129554 A1, 30.10.2008. SONODA S. Et al., «A protocol for the culture and differentiation of highly polarized human retinal pigment epithelial cells», Nature Protocols, 2009, v.4, p.662-673.
Имя заявителя:
РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ, ОТ ИМЕНИ КОТОРОЙ ВЫСТУПАЕТ ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО НАУКЕ И ИННОВАЦИЯМ (RU), УЧРЕЖДЕНИЕ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК ИНСТИТУТ БИОЛОГИИ РАЗВИТИЯ ИМ. Н.К. КОЛЬЦОВА РАН (RU)
Изобретатели:
Александрова Мария Анатольевна (RU) Милюшина Любовь Александровна (RU) Кузнецова Алла Викторовна (RU)
Патентообладатели:
РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ, ОТ ИМЕНИ КОТОРОЙ ВЫСТУПАЕТ ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО НАУКЕ И ИННОВАЦИЯМ (RU) УЧРЕЖДЕНИЕ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК ИНСТИТУТ БИОЛОГИИ РАЗВИТИЯ ИМ. Н.К. КОЛЬЦОВА РАН (RU)
Реферат
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению дедифференцированных клеток ретинального пигментного эпителия глаза взрослого человека, и может быть использовано в нейробиологии и офтальмологии. Энуклиируют глазное яблоко при аутопсии, промывают его в спиртовом растворе и в растворе Хенкса без Са2+, Mg2+ с антибиотиком, удаляют по зубчатой линии передний сегмент глазного яблока, отделяют стекловидное тело и нейральную сетчатку от пигментного эпителия, наполняют глазную чашу раствором Хенкса без Са2+, Mg2+ с ЭДТА и инкубируют клетки ретинального пигментного эпителия в течение 15-30 мин, полученные клетки собирают пипеткой и переносят в стерильную среду для выделения, пипетируют, центрифугируют, выделенные клетки ресуспендируют в ростовой среде с высоким содержанием сыворотки, затем полученную суспензию клеток ретинального пигментного эпителия распределяют на культуральной поверхности и культивируют до достижения прикрепившимися клетками 15-25% ее площади, суспензию с неприкрепившимися клетками аспирируют, распределяют на свежей культуральной поверхности и культивируют, а к прикрепившимся клеткам добавляют ростовую среду с высоким содержанием сыворотки и культивируют до достижения конфлюэнтного монослоя целевого продукта. Изобретение позволяет исключить повреждающее действия ферментов и достичь прикрепления на культуральной поверхности популяции клеток с более низкими адгезивными свойствами. 12 з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл.
Поиск патентов
Получить полное описание патента