WO 9415459, 21.07.1994. BERRY M.N.: «High-yield preparation of isolated rat liver parenchymal cells», 1969, J. Cell Biol., Vol 43, p.506-520. PEREA M.Sc. A.: «Stadies on the effect of syntetic amino acid mixtures on bile secretion in the isolated perfused rat liver», 1987, Vol 7, Issue 1, p.89-99.
Имя заявителя:
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Омский государственный педагогический университет" (ГОУ ОмГПУ) (RU)
Изобретатели:
Антонова Елена Ивановна (RU) Мкртчан Офелия Завеновна (RU) Плешакова Валентина Ивановна (RU) Высокогорский Валерий Евгеньевич (RU)
Патентообладатели:
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Омский государственный педагогический университет" (ГОУ ОмГПУ) (RU)
Реферат
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к выделению гепатоцитов животных с пойкилотермной системой терморегуляции, и может быть использовано при диагностике вирусных инфекций и производстве вакцин. Выделяют гепатоциты с использованием при вторичном перфузировании трех-четырехкратной обработки печени раствором Хэнкса, содержащим ионы кальция и коллагеназу I типа в концентрации от 0,02 до 0,05% по 10 минут при температуре перфузата 0-4°С. Очистку гепатоцитов в фиколловом градиенте проводят трех-четырехкратно с добавлением 0,5-1,15 М углеводов, например сахарозы, 15 мин на центрифуге при 1000 об/мин при температуре 20°С. Получение клеточной суспензии гепатоцитов путем дифференциального центрифугирования проводят в течение 2 минут при 700 об/минуту. Исходную клеточную суспензию гепатоцитов предварительно инкубируют при комнатной температуре в течение 20 минут. Изобретение позволяет повысить выход жизнеспособных гепатоцитов животных с пойкилотермной системой терморегуляции на 20% по сравнению с традиционной методикой выделения клеток. 4 табл.