RU 2381274 C2, 10.02.2010. RU 2282661 C2, 27.08.2006. OETTINGER T. et al. "Cloning and B-cell epitope mapping ofMRT64 from M. tuberculosis H37Rv", Infection and Immunity, 62(5), 1994, p.2708-2764. RU 2277540 C2, 10.06.2006. WO 9113157 A1, 05.09.1991.
Имя заявителя:
Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор") (RU)
Изобретатели:
Туманов Юрий Васильевич (RU) Смирнова Ольга Юрьевна (RU) Болдырев Александр Николаевич (RU)
Патентообладатели:
Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор") (RU)
Реферат
Рекомбинантная плазмидная ДНК рТВ323 по изобретению, кодирующая гибридный полипептид глутатион-S-трансфераза (GST) и укороченный вариант белка МРТ64 (rМРТ64), имеет среднюю м.м. 3,6 МДа, размер 5574 п.н., состоит из: а) EcoRI-BamHI-фрагмента векторной плазмиды pGEX-2T размером 4938 п.н., содержащего ген -лактамазы, индуцируемый tac-промотор, внутренний ген lacI q, кодирующий белок-репрессор лактозного оперона, фрагмент гена глутатион-S-трансферазы из S. japonicum с множественным сайтом для клонирования (МСК) генов в 3'-концевой части этого гена и нуклеотидной последовательностью, кодирующей сайт протеолиза тромбина и располагающейся перед МСК; б) EcoRI-BamHI-фрагмента размером 636 п.н., содержащего фланкированный сайтами для эндонуклеаз рестрикции EcoRI и BamHI укороченный ген МРТ64, полученный амплификацией соответствующего гену фрагмента с геномной ДНК М. tuberculosis; в) генетического маркера - ген -лактамазы, детерминирующий устойчивость трансформированных плазмидой рТВ323 клеток Е. coli к антибиотику ампициллину; г) уникальные сайты рестрикции: BamHI - 930/934, EcoRI - 1566/1570. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli BL21/pTB323 - продуцент гибридного полипептида GST-МРТ64 со свойствами микобактериального антигена МРТ64 депонированв Коллекции культур микроорганизмов ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" под В-1028. Рекомбинантный полипептид GST-MPT64, продуцируемый рекомбинантным штаммом по изобретению, содержит в качестве белка-носителя N-концевой полипептидный фрагмент глутатион-S-трансферазы S.j. (226 а.о., 26,31 кДа) и имеет полную аминокислотную последовательность (431 а.о., 48,76 кДа), приведенную в описании. Использование изобретения позволяет нарабатывать высокоочищенный полипептид в препаративных количествах при сохранении иммуногенных свойств и возможности отделения целевого белка от аминокислотной последовательности белка-носителя для исследования иммуногенных свойств целевого белка. 3 н.п. ф-лы, 4 ил., 4 табл., 6 пр.
Поиск патентов
Получить полное описание патента