2006123543, 10.01.2008. WO 2005054289 A1, 16.06.2005. WO 2005054288 A1, 16.06.2005. RUSSELL-HARDE D. ET AL., The use of Zwittergent 3-14 in the purification of recombinant human interferon-beta Serl7 (Betaseron), J Interferon Cytokine Res., 1995, v.15, n.1, p.31-37.
Имя заявителя:
Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU), Российская Федерация, от имени которой выступает Федеральное агентство по науке и инновациям (RU)
Изобретатели:
Воробьев Иван Иванович (RU) Пономаренко Наталья Александровна (RU) Мирошников Анатолий Иванович (RU) Смирнов Иван Витальевич (RU)
Патентообладатели:
Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU) Российская Федерация, от имени которой выступает Федеральное агентство по науке и инновациям (RU)
Реферат
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу получения рекомбинантного интерферона бета-1b человека. Предложенный способ очистки рекомбинантного интерферона бета-1b человека (рИФН бета-1b) предусматривает оптимизацию процессов отмывания тел включения, их растворения и рефолдинга целевого белка. Очистка рИФН бета-1b человека ведется с использованием в качестве основного детергента цвиттергента 3-14 для отмывки и растворения тел включения E.coli с последующим рефолдингом рИФН бета-1b, после чего осуществляют прехроматографическую обработку образца. Далее проводят хроматографию на Ceramic S, хроматографию на Source S30 и окисление с использованием смеси цистеамин/цистамин, после чего делают гель-фильтрацию на Superdex 75 Prep grade, хроматографию на Source Q30, гель-фильтрации на Sephacril S200HR и в конце осуществляют контроль эффективности очистки целевого белка методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Предложенный способ очистки позволяет обеспечить 10% выход целевого белка и получить рИФН бета-1b человека, отвечающий требованиям нормативных документов с высоким уровнем удельной противовирусной активности. 5 табл.