AZZI А. ЕТ AL. The use of acetylated ferricytochrome c for the detection of superoxide radicals produced in biological membranes, Biochem Biophys Res Commun, 1975, v.22, p.597-603. ДОЛГИХ Д.А. И ДР. Экспрессия мутантных генов цитохрома с лошади в Escherichia coli. Биоорганическая химия, 1998, т.24, 10, с 756-759.
Имя заявителя:
Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU)
Изобретатели:
Черткова Рита Валерьевна (RU) Пепелина Татьяна Юрьевна (RU) Островерхова Татьяна Владимировна (RU) Долгих Дмитрий Александрович (RU) Виноградов Андрей Дмитриевич (RU) Гривенникова Вера Георгиевна (RU) Кирпичников Михаил Петрович (RU)
Патентообладатели:
Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU)
Реферат
Изобретение относится к биотехнологии. В частности, к способу получения рекомбинантного мутантного цитохрома с лошади. Данный способ осуществляют введением мутаций К27Е/Е69К/К72Е/К86Е/К87Е/Е90К или К8Е/Е62К/Е69К/К72Е/К86Е/К87Е, или К8Е/К27Е/Е62К/Е69К/К72Е/К86Е/К87Е/Е90К с помощью метода сайт-направленного мутагенеза, в ген цитохрома с лошади, который находится в составе плазмидной ДНК pBPCYCS/3. Далее проводят трансформацию штамма Escherichia coli JM-109 полученной рекомбинантной плазмидной ДНК, экспрессию и выделение целевого белка с помощью катионообменной и адсорбционной хроматографии. Изобретение позволяет использовать рекомбинантный мутантный цитохром с лошади в качестве тест-системы для измерения скорости генерации супероксида в мембранных препаратах. 3 ил.