РЕКОМБИНАНТНЫЕ ДНК, ОБЕСПЕЧИВАЮЩИЕ ПОЛУЧЕНИЕ ПОЛИПЕПТИДОВ Р6, Р7, Р8, ОБЛАДАЮЩИХ ПРОТЕКТИВНЫМИ СВОЙСТВАМИ В ОТНОШЕНИИ STREPTOCOCCUS AGALACTIAE И СЕЛЕКТИВНО - СВЯЗЫВАЮЩИХ IgA
US 2006275315 A1, 07.12.2006. US 2007053924 A1, 08.03.2007. RU 2113234 C1, 20.06.1998. US 2007275004 A1, 29.11.2007. RU 2209247 C2, 27.07.2003.
Имя заявителя:
Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Северо-Западного отделения РАМН (НИИЭМ СЗО РАМН) (RU)
Изобретатели:
Суворов Александр Николаевич (RU) Устинович Ирина Анатольевна (RU) Мерингова Людмила Федоровна (RU) Леонтьева Галина Федоровна (RU) Грабовская Корнелия Борисовна (RU) Коржуева Александра Сергеевна (RU)
Патентообладатели:
Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Северо-Западного отделения РАМН (НИИЭМ СЗО РАМН) (RU)
Реферат
Изобретение может быть использовано при производстве вакцин против Streptococcus agalactiae - представителя стрептококков группы В (СГВ), при диагностике заболеваний - для создания системы по детекции уровня иммуноглобулина А в биологических жидкостях, в иммунохимии в качестве доступных иммунохимических реагентов (аффинное выделение фрагментов IgA). Предлагаемые уникальные рекомбинантные ДНК получены методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием хромосомной ДНК штамма 219/4849 Ibc серотипа СГВ и уникальных праймеров. Одна из рекомбинантных ДНК содержит три нуклеотидные замены по сравнению с исходным участком хромосомной ДНК. Последующее клонирование амплифицированных фрагментов осуществлено в линейном векторе pGEM-T Easy, а на конечном этапе посредством системы экспрессионных векторов pQE30/31/32 в Е.coli JM 109. Полученные рекомбинантные ДНК кодируют аминокислотные последовательности рекомбинантных полипептидов, обладающих способностью селективно связывать различные молекулярные формы IgA и обозначенных как Р6, Р7, Р8. Полипептид Р6 вызывает синтез длительно циркулирующих высокоаффинных анти-Р6 антител, обладающих протективными свойствами против СГВ. Использование изобретения обеспечивает получение на основе N-терминальной консервативной части поверхностного Вас белка СГВ Ibc серотипа рекомбинантных полипептидов, включающих первый IgA-связывающий сайт А с измененной или нативной последовательностью MLKKIE, при этом полипептиды обладают иммуногенными и протективными свойствами, а также высокоселективно связывают IgA. 12 н.п. ф-лы, 20 ил., 4 табл.