AZZI A. "The use of acetylated fericytochrome с for the detection of superoxide radicals produced in biological membranes" Biochem. Biophys. Res. Commun. 1975, v.22, p.597-603. FORMAN H.J. "Superoxide dismutase: a comparison of rate constants" Arch Biochem Biophys. 1973, v.158, p.396-400. THOMSON L. "Kinetics of cytochrome c2+ oxidation byperoxynitrite: implications for superoxide measurements in nitric oxide-producing biological systems" Arch Biochem Biophys. 1995, v.319, 2, p.396-400. МЯТЛЕВА О. В. Влияние меди на строение и функционирование метанолоксидазной системы у облигатного метилотрофа Methylobacillus flagellatum КТ, "Ломоносов-1999", 20-24 апреля 1999, с.44.
Имя заявителя:
Учреждение Российской академии наук Институт биологической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU)
Изобретатели:
Черткова Рита Валерьевна (RU) Пепелина Татьяна Юрьевна (RU) Долгих Дмитрий Александрович (RU) Виноградов Андрей Дмитриевич (RU) Гривенникова Вера Георгиевна (RU) Кирпичников Михаил Петрович (RU)
Патентообладатели:
Учреждение Российской академии наук Институт биологической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU)
Реферат
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способу определения скорости генерации супероксида. Способ может быть использован для количественного определения супероксида в мембранных препаратах (микросом, митохондрий), обладающих цитохром с - редуктазной и цитохром с - оксидазной активностью. Кроме того, возможно его использование в медицинской биохимии для исследования роли супероксида в патогенезе нейродегенеративных заболеваний. Способ включает приготовление среды измерения, смешивание источника супероксида со средой измерения, добавление в полученную смесь субстрата окисления и мутантного цитохрома с К27Е/Е69К/К72Е/К86Е/К87Е/Е90К или К8Е/Е62К/Е69К7К72Е/К86Е/К87Е, или К8Е/К27Е/Е62К/Е69К/К72Е/К86Е/К87Е/Е90К. Спектрофотометрически проводят измерение скорости восстановления производного цитохрома с и определяют скорость генерации супероксида. Способ является более простым в сравнении с известными аналогами и позволяет определить скорость генерации супероксида с повышенной точностью. 1 табл., 4 ил.