АДАМС Р. Методы культуры клеток для биохимиков. - М.: Мир, 1983, с.70-72. WO 9415459 A1, 21.07.1994. BERRY MN et al., High-yield preparation of isolated rat liver parenchymal cells: a biochemical and fine structural study, J Cell Biol., 1969, v.43, 3, p.506-520.
Имя заявителя:
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Омский государственный педагогический университет" (ГОУ ОмГПУ) (RU)
Изобретатели:
Антонова Елена Ивановна (RU) Мкртчан Офелия Завеновна (RU) Плешакова Валентина Ивановна (RU) Высокогорский Валерий Евгеньевич (RU)
Патентообладатели:
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Омский государственный педагогический университет" (ГОУ ОмГПУ) (RU)
Реферат
Изобретение относится к области биологии и медицины и касается способа выделения гепатоцитов птиц вида Columba livia. Представленный способ включает вскрытие брюшной полости, канюлирование v.portae, через которую осуществляют двухэтапное перфузирование, механическую обработку печени, очистку гепатоцитов, фильтрацию и дифференциальное центрифугирование, предварительную инкубацию и высевание гепатоцитов в камере Горяева, при этом первичное перфузирвание печени проводят бескальциевым раствором Хэнкса, а вторичное перфузирование печени проводят трех-четырехкратно раствором Хэнкса, содержащим ионы кальция и коллагеназу I типа в концентрации 0,02-0,05% по 20 мин при температуре перфузата 15-16°С, очистку гепатоцитов в фиколловом градиенте проводят трех-четырехкратно по 15 мин на центрифуге при 1000 об/мин при температуре 20°С с добавлением 0,5-1,15 М сахарозы, дифференциальное центрифугирование проводят при 700 об/мин с экспозицией в 2 мин, а предварительную инкубацию гепатоцитов проводят при 37°С в течение 20 мин. Представленное изобретение позволяет повысить процент выхода жизнеспособных гепатоцитов птиц вида Columba livia, а также может быть использовано для изучения механизмов функционирования клеток, при диагностике вирусных инфекций, при производстве вакцин, корректировке функций поврежденных тканей печени. 3 табл.