ПОНОМАРЕНКО Н.А. Каталитические антитела - протеазы, 2008: Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук, с.49. BELOGUROV А.А. et al. Recognition and Degradation of Myelin Basic Protein Peptides by Serum Autoantibodies: Novel Biomarker for Multiple Sclerosis, The Journal of Immunology, 2008, v.180, n.2, p.1258-1267. EP 1674478 A1, 28.06.2006.
Имя заявителя:
Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU), Российская Федерация, от имени которой выступает Федеральное агентство по науке и инновациям (RU)
Изобретатели:
Габибов Александр Габибович (RU) Белогуров Алексей Анатольевич (RU) Пономаренко Наталья Александровна (RU) Захарова Мария Юрьевна (RU) Мирошников Анатолий Иванович (RU)
Патентообладатели:
Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU) Российская Федерация, от имени которой выступает Федеральное агентство по науке и инновациям (RU)
Реферат
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению рекомбинантных биомаркеров полипептидной природы, и может быть использовано в диагностике рассеянного склероза. Для получения белка PS-CFP2/TurboYFP_MBP7 конструируют рекомбинантную плазмидную ДНК PS-CFP2/TurboYFP_MBP7 размером 4916 п.о., кодирующую гибридный белок, содержащий последовательность белков PS-CFP2 и Turbo YFP, соединенных фрагментом основного белка миелина 80-104. В состав плазмидной ДНК также входит промотор транскрипции Т5 РНК-полимеразы, участок связывания рибосомы; фрагмент ДНК плазмиды ген -лактамазы, детерминирующий устойчивость клеток Escherichia coli к ампициллину, в качестве генетического маркера. Полученной плазмидной ДНК трансформируют клетки штамма Escherichia coli BL21(DE3) с получением штамма-продуцента гибридного белка PS-CFP2/TurboYFP_MBP7. Для получения белка PS-CFP2/TurboYFP_MBP7 проводят культивирование штамма-продуцента Escherichia coli BL21(DE3)/pQe30_PS-CFP2/TurboYFP_MBP7, разрушают клетки и очищают целевой белок методом аффинной и гель-фильтрационной хроматографии. Изобретение позволяет повысить чувствительность и стабильность биосенсора, а также расширить его специфичность в отношении пула каталитических антител. 3 н.п. ф-лы, 7 ил., 1 табл.