РЕКОМБИНАНТНАЯ БАКТЕРИЙНАЯ ПЛАЗМИДА, ЭКСПРЕССИРУЮЩАЯ БЕЛОК ПАТОГЕНА И БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЙ ФРАГМЕНТ ОРНИТИНДЕКАРБОКСИЛАЗЫ В КЛЕТКАХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ, ПРЕДНАЗНАЧЕННАЯ ДЛЯ РАЗРАБОТКИ СРЕДСТВ ПРОФИЛАКТИКИ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ (НА ПРИМЕРЕ ВИРУСА КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА)
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научный центр "Институт иммунологии" Федерального медико-биологического агентства (RU), Российская Федерация, от имени которой выступает Министерство образования и науки Российской Федерации (RU)
Изобретатели:
Карпов Вадим Львович (RU) Тимофеев Андрей Викторович (RU) Кузьменко Юлия Викторовна (RU) Стародубова Елизавета Сергеевна (RU) Мартынов Александр Игоревич (RU)
Патентообладатели:
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научный центр "Институт иммунологии" Федерального медико-биологического агентства (RU) Российская Федерация, от имени которой выступает Министерство образования и науки Российской Федерации (RU)
Реферат
Изобретение относится к биотехнологии, иммунологии и молекулярной биологии. Предложенный способ модификации ДНК-вакцинного препарата основан на слиянии гена неструктурного белка NS 1 ВКЭ с фрагментом гена белка орнитиндекарбоксилазы мыши. Клонируют ген неструктурного белка NS1 в плазмиду, предназначенную для экспрессии белков в клетках эукариот. Осуществляют сайт-направленный мутагенез 5'-концевого фрагмента вирусного гена с целью удаления стоп-кодона. Клонируют фрагмент гена орнитиндекарбоксилазы, кодирующего 53 С-концевые аминокислоты и содержащего на 5'-конце стоп-кодон. Нарабатывают плазмиды в клетках E.coli и производят последующую очистку в условиях пониженного содержания эндотоксинов. Осуществляют трансфекцию плазмидным препаратом культуры клеток эукариот с последующим иммуноблот-анализом синтеза химерного белка в клетках. Проводят иммунизацию мышей и анализ протективных свойств модифицированного препарата. Предложенное изобретение позволяет повысить эффективность ДНК-вакцинных препаратов как средств профилактики заболеваний клещевым энцефалитом. 5 ил.