На данной странице представлена ознакомительная часть выбранного Вами патента
Для получения более подробной информации о патенте (полное описание, формула изобретения и т.д.) Вам необходимо сделать заказ. Нажмите на «Корзину»
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЕНЕРАЦИИ СУПЕРОКСИДНОГО АНИОН - РАДИКАЛА КЛЕТКАМИ В БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ | ![](Images/non.gif) |
Номер публикации патента: 2064679 | ![](Images/empty.gif) |
Редакция МПК: | 6 | Основные коды МПК: | G01N033/53 | Аналоги изобретения: | Авторское свидетельство СССР N 1735784, кл. G O1 33/53, 1992. |
Имя заявителя: | Коган Алтар Хунович | Изобретатели: | Коган А.Х. Хапугина И.В. Расулов М.И. Рапопорт С.И. Погромов А.П. | Патентообладатели: | Коган Алтар Хунович |
Реферат | ![](Images/empty.gif) |
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения генерации супероксидного анион-радикала (САР) клетками в биологическом материале. Цель изобретения - разработка метода определения генерации CAP суммарно паренхиматозными и интерстициальными (соединительнотканными) клетками внутренних органов. У обследуемого человека или животного получают микробиоптаты при эндоскопии полостных органов (желудка, кишечника, бронхов и др.) или путем забора кусочков тканей неполостных органов (печени, почки и др. ) с помощью биопсийных игл, отмывают их буферной смесью рН 7.35, высушивают фильтровальной бумагой, взвешивают биоптаты с высокой точностью (до 10-5 г. ), измельчают их глазными ножницами, инкубируют с 0,2% водно-спиртовым раствором тритона Х-100, после чего отмывают измельченные биоптаты от следов тритона, инкубируют их в опыте с супероксид-дисмутазой (СОД),а в контроле - с альбумином, опытные и контрольные измельченные биоптаты инкубируют с восстановленным никотинамидадениндинуклеотидфосфатом (NАДPН), стимулирующим генерацию CAP клетками, и нитросиним тетразолием, выявляющим CAP в виде формазанов, при 36,9-37,0oС 40-60 минут. Останавливают реакцию добавлением 5М соляной кислоты, затем проводят центрифугирование и осадок формазанов экстрагируют смесью диметилсульфоксида и хлороформа, взятых в соотношении 2: 1, при 55,0-59,0oС с последующим определением супероксидного анион-радикала спектрофотометрически. Полученные спектрофотометрические данные оптической плотности пересчитывают на 1 мг биоптата. Разность значений между контрольной и опытной пробой показывает концентрацию CAP по оптической плотности продуктов реакции взаимодействия CAP и нитросинего тетразолия - формазанов. Прототип не пригоден для определения генерации CAP суммарно паренхиматозными и интерстициальными клетками тканей внутренних органов.
|