PALLI S.R. ет al. Eur.J.Biochem., 270, 1308-1315, 2003. WO 01/70816 A2, 27.09.2001. KUMAR M.B. ет al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 99, (23) 14710-14715, 2002.
Имя заявителя:
ИНТРЕКСОН КОРПОРЕЙШН (US)
Изобретатели:
ПАЛЛИ Сабба Редди (CA) КУМАР Мохан Басаварайи (IN)
Патентообладатели:
ИНТРЕКСОН КОРПОРЕЙШН (US)
Приоритетные данные:
30.04.2004 US 60/567,294 13.09.2004 US 60/609,424 29.04.2005 US 11/118,855
Реферат
Данное изобретение относится к области генной инженерии и может быть использовано при получении белков методом рекомбинантных ДНК. Предложена система модулирования экспрессии индуцибельного гена на основе ядерного рецептора, которая включает две кассеты экспрессии, где первая кассета содержит полинуклеотид, кодирующий первый полипептид, который состоит из а) ДНК-связывающего домена, представленного доменом рецептора экдизона (EcR), GAL4 или LexA, и б) лигандсвязывающего домена (LBD) EcR, содержащего, по меньшей мере, мутацию в положении, соответствующем положению 132 в последовательности экдизонового рецептора Chotistoneura fumiferana (CfEcR), которая обеспечивает повышение чувствительности системы к диацилгидразиновым лигандам, а вторая кассета экспрессии содержит полинуклеотид, кодирующий второй полипептид, который состоит из а) домена трансактивации, представленного доменом трансактивации EcR, VP16, кислотного активатора В42 или р65, и б) второго LBD, который является доменом ядерного рецептора, способным димеризоваться с первым мутантным LBD, предпочтительно лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора. Применение настоящего изобретения обеспечивает возможность регулирования экспрессии рекомбинантных белков неприродными синтетическими лигандами и, соответственно, получение целевых продуктов в любых типах животных и растительных клеток-хозяев. 4 н. и 8 з.п. ф-лы, 14 табл., 10 пр.