TRICOIRE L et al. Calcium dependence of aequorin bioluminescence dissected by random mutagenesis. Proc Natl Acad Sci USA. 2006 Jun 20; 103(25):9500-5. KENDALL J.M. et al. Targeting aequorin to the endoplasmic reticulum of living cells. Biochem Biophys Res Commun. 1992 Dec 15; 189(2): 1008-16. MARKOVA S.V. et al. Obelin from the bioluminescentmarine hydroid Obelia geniculata: cloning, expression, and comparison of some properties with those of other Ca2+-regulated photoproteins. Biochemistry. 2002 Feb 19; 41(7):2227-36. МАЛИКОВА Н.П. Роль триптофановых остатков активного центра в биолюминесцентной реакции фотопротеина обелина. Автореферат на соискание ученой степени кандидата биологических наук. - Красноярск, 2004. ВЫСОЦКИЙ Е.С. и др. Кальций-регулируемые фотопротеины морских кишечнополостных. Молекулярная биология, 2006, том 40, 3, с.404-417.
Имя заявителя:
Институт биофизики Сибирского отделения РАН (RU), Маликова Наталья Петровна (RU), Высоцкий Евгений Степанович (RU), Маркова Светлана Владимировна (RU), Степанюк Галина Анатольевна (RU)
Институт биофизики Сибирского отделения РАН (RU) Маликова Наталья Петровна (RU) Высоцкий Евгений Степанович (RU) Маркова Светлана Владимировна (RU) Степанюк Галина Анатольевна (RU)
Реферат
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой мутантный фотопротеин для определения внутриклеточного кальция одновременно в разных органеллах клетки, обладающий светоизлучающей функцией и характеризующийся аминокислотной последовательностью кальций-регулируемого фотопротеина дикого типа, в которой природные остатки фенилаланина, относящиеся к консервативным областям названной последовательности и соответствующие остатку 119 фотопротеина обелина Obelia longissima, а также остатку 88 обелина Obelia longissima заменены другими остатками, отличными от фенилаланина, замены которых приводят к тому, что чувствительность кальций-регулируемого фотопротеина к ионам кальция уменьшается по сравнению с фотопротеином дикого типа и изменяется длина волны испускаемого света по сравнению с фотопротеином дикого типа. Изобретение относится также к еще одному мутантному протеину, имеющему замену в положении 144 фотопротеина обелина Obelia longissima. Изобретение относится также к ДНК, кодирующим указанные выше белки, а также к векторам для экспрессии белков. Изобретение позволяет получить новые формы фотопротеина с измененной чувствительностью к кальцию и измененной длиной волны испускаемого света. 6 н. и 7 з.п. ф-лы, 5 ил.